Avaliação técnico-regulatória dos requisitos de qualidade para registro de medicamentos biológicos e biossimilares humanos: perspectivas e desafios no Brasil / Technical and regulatory evaluation of quality requirements for the registration of human biological and biosimilar drugs: perspectives and challenges in Brazil

Medicamentos biológicos são obtidos a partir de fluidos biológicos ou tecidos de origem animal por procedimentos biotecnológicos e, a partir do vencimento das suas patentes, surge a possibilidade da produção de suas cópias, os chamados biossimilares. Este tema, além de polêmico, por ainda apresentar divergências de entendimento da classe científica, também engloba 4 das 5 classes terapêuticas de medicamentos mais vendidas, e apresenta evolução crescente no mercado farmacêutico. Com o aumento da demanda, cresce o interesse na produção de medicamentos biológicos de alta qualidade, com a mesma eficácia, porém a preços mais baixos. Dessa forma, é possível entender a responsabilidade das regulamentações, principalmente no que diz respeito aos biossimilares, a fim de que eles respeitem os requisitos mínimos necessários para serem comparáveis ao seu medicamento biológico novo. Assim, este trabalho teve como objetivo avaliar questões técnico-regulatórias e os requisitos de qualidade para registro de medicamentos biológicos e biossimilares humanos frente a diferentes Autoridades Sanitárias mundiais. A análise foi baseada em três moléculas biológicas, sendo a clássica heparina e moléculas novas, filgrastim e infliximabe. Foi constatado que na teoria, a legislação brasileira é baseada em regulamentos internacionais, especialmente da Federal and Drug Administration (FDA) e European Medicines Agency (EMA), e que na prática, o Brasil tem se mostrado mais conservador na extrapolação de indicação e na aprovação dos biossimilares. Ainda, foi possível notar que independente do país, as Farmacopeias ainda necessitam de aprimoramento com relação a este tema, pois em sua maioria, não existe padronização dos parâmetros e testes a serem realizados. Pesquisa demonstrou que o conhecimento sobre biossimilares ainda não está consolidado entre profissionais médicos e que, portanto, há necessidade de programas para esclarecimentos, com a finalidade de estimular seu uso, quando possível e com custos mais interessantes

Biological drugs are obtained from biological fluids or animals tissues by biotechnological procedures and, from the expiration of their patents, the possibility of producing their "copies", the so-called biosimilars, arises. In addition to being a controversial subject, as it still presents divergences of understanding by the scientific class, it also encompasses 4 of the 5 therapeutic classes of best-selling drugs, and it presents an increasing evolution in the pharmaceutical market. As demand increases, interest in the production of high-quality biological drugs with the same effectiveness, but at lower prices, also increases. In this way, it is possible to understand the responsibility of regulations, especially with regard to biosimilars, so that they comply with the minimum requirements needed to be comparable to their reference biological medicine. Thus, the objective of this project was to evaluate technical and regulatory topics, as well as quality requirements for the registration of human biological and biosimilar medicines under the perspective of different Health Authorities around the world. The analysis was based on three biological molecules, being the classic heparin and new molecules, filgrastim and infliximab. It was found that in theory, Brazilian regulation is based on international regulations, especially the Federal and Drug Administration (FDA) and the European Medicines Agency (EMA), and that in practice, Brazil has been more conservative in the extrapolation of indication and approval of biosimilars. Also, it was possible to note that, regardless the country, Pharmacopoeias still need to be improved for this topic, since in general, there is no standardization of the parameters and tests to be performed. Research showed that the knowledge about biosimilars is not yet consolidated among doctors and that, therefore, there is a need for clarification programs, with the purpose of stimulating their use, when possible and at lower costs

Efficacy of an Organic Solvent and Ultrasound for Filling Material Removal

The aim of this study was to investigate whether a final rinse with Endosolv R® solvent and ultrasound resulted in cleaner root canal walls during endodontic retreatment. A total of 56 extracted premolar teeth were manually instrumented using a step-back flare technique and filled with gutta-percha and AH Plus sealer. After 9 months, the canals were retreated by removing the gutta-percha and sealer with ProTaper Universal Retreatment and rotary preparation with ProTaper Universal System up to an F5 file. As a final step, the teeth were randomly divided in 4 groups (n=14) and were subjected to passive ultrasonic irrigation (PUI) with either Endosolv R or distilled water. In the control groups, the irrigants were left undisturbed. Roots were cleaved and examined under scanning electron microscopy (SEM), and the amount of filling remnants on the canal walls was assessed by two calibrated examiners in a blinded fashion. Data were analyzed by the Kruskal-Wallis test and the Student-Newman-Keuls post hoc test (α=0.05). All groups presented filling debris in the three root canal thirds after retreatment. There were no significant differences between the groups or among the root canal thirds within each group (p>0.05). PUI with Endosolv R was not effective in the removal of filling debris from root canal walls.

O objetivo deste estudo foi investigar se a irrigação final com o solvente Endosolv R® e ultrassom promovia maior limpeza nas paredes do canal radicular durante o retratamento endodôntico. Um total de 56 dentes pré-molares extraídos foram instrumentados manualmente utilizandose a técnica escalonada e obturados com guta-percha e cimento AH Plus. Após nove meses, os canais foram retratados através da remoção da guta-percha e do cimento com Protaper Universal Retratamento e preparo rotatório com Sistema Protaper Universal até o instrumento F5. Após essa etapa, a amostra foi aleatoriamente dividida em quatro grupos (n=14) e os dentes submetidos à irrigação ultrassônica passiva (PUI) associada ao solvente Endosolv R ou à água destilada. Nos grupos controle, os irrigantes permaneceram sem agitação. Em seguida as raízes foram clivadas e examinadas sob microscopia eletrônica de varredura (MEV) para que a quantidade de material obturador remanescente nas paredes do canal fosse avaliada por dois examinadores treinados de forma cega. Os dados foram analisados através dos testes de Kruskal-Wallis e de Student-Newman-Keuls post hoc (α=0.05). Todos os grupos apresentaram resíduos de materiais obturadores nos três terços do canal radicular após o retratamento. Não houve diferenças significativas entre os grupos ou entre os terços dos canais em cada um dos grupos (p>0,05). Concluiu-se que PUI com Endosolv R não foi efetiva para a remoção de remanescentes de material obturador das paredes do canal radicular.

Comparison of PCR-based molecular markers for the characterization of Proteus mirabilis clinical isolates

Proteus mirabilis is one of the most important pathogens associated with complicated urinary tract infections (acute pyelonephritis, bladder infections, kidney stones) and bacteremia, affecting patients with anatomical abnormalities, immunodeficiency, and long-term urinary catheterization. For epidemiological purposes, various molecular typing methods, such as pulse-field gel electrophoresis (PFGE) or ribotyping, have been developed for this pathogen. However, these methods are labor intensive and time-consuming. We evaluated the discriminatory power of several PCR-based fingerprinting methods (RAPD, ISSR, ERIC-PCR, BOX-PCR and rep-PCR) for P. mirabilis clinical isolates. Typing patterns and clustering analysis indicated that RAPD, BOX-PCR and ERIC-PCR differentiated P. mirabilis strains from Escherichia coli, Hafnia alvei, and Morganella morganii. With the exception of rep-PCR, the methods gave medium to high discriminatory efficiency in P. mirabilis. In general, the results obtained with RAPD, BOX-PCR and ERIC-PCR were in good agreement. We concluded that a combination of ERIC-PCR and BOX-PCR results is a rapid and reliable alternative for discrimination among P. mirabilis clinical isolates, contributing to epidemiological studies.

Pathogenic factors and antimicrobial resistance of Staphylococcus epidermidis associated with nosocomial infections occurring in intensive care units

As infecções nosocomiais constituem um importante problema em hospitais, sendo que as unidades de terapia intensiva (UTI) apresentam a maior incidência deste tipo de infecções. Os estafilococos, especialmente S. epidermidis e S. aureus, estão entre os microrganismos mais importantes associados às infecções nosocomiais. S. epidermidis é uma espécie colonizante da pele, sendo frequentemente inoculado durante procedimentos invasivos ou veiculado pela equipe de saúde, e essa situação é agravada pela emergência de cepas multirresistentes endêmicas no ambiente hospitalar. No presente trabalho foi avaliada a resistência a antibióticos e presença de distintos fatores de patogenicidade em 98 isolados clínicos de S. epidermidis obtidos de vários materiais em unidades de terapia intensiva e 20 colonizantes de pele de voluntários saudáveis. Os resultados obtidos mostraram elevada freqüência de isolados clínicos multirresistentes a antibióticos (76,5 per center), enquanto esta não foi detectada em isolados de voluntários saudáveis. A frequência de isolados multiresistentes foi 67,7 per center na UTI neonatal, 66,6 per center na UTI pediátrica, e 60,8 per center na UTI adulto, a menor freqüência de isolados multirresistentes na UTI adulto é indicativo de maior incidência de cepas comunitárias nesse local. As diferenças significativas na freqüência de isolados com atividades hemolítica, proteolítica e formação de biofilme, encontradas entre isolados clínicos e controles, indica a maior incidência de cepas com potencial patogênico no ambiente hospitalar. Não foi observada correlação entre multirresistência e fatores de patogenicidade, exceto uma baixa correlação positiva com a atividade hemolítica.

The effect of organic osmoprotectors on Aeromonas trota and A. hydrophila grown under high sodium chloride concentrations

O efeito de solutos orgânicos no crescimento de Aeromonas trota e A. hydrophila foi avaliado. A prolina e o ácido glutâmico não apresentaram efeito osmoprotetor, mas a betaina exerceu osmoproteção permitindo o crescimento de ambas bactérias em concentrações inibitórias de NaCl. A cinética do crescimento sugere que a diferença em halotolerância entre as linhagens está associada à síntese de osmolitos, mais do que à capacidade de acúmulo de betaina.

The effect of organic osmoprotectors on Aeromonas trota and A. hydrophila grown under high sodium chloride concentrations

The effect of organic solutes on the growth of Aeromonas trota and A. hydrophila was evaluated. Proline and glutamic acid were not effective as osmoprotectors, but betaine exerts osmoprotection allowing the growth of both strains in inhibitory concentrations of NaCl. Growth kinetics suggests that the halotolerance difference between the strains is associated with the synthesis of osmolytes rather than betaine uptake.

O efeito de solutos orgânicos no crescimento de Aeromonas trota e A. hydrophila foi avaliado. A prolina e o ácido glutâmico não apresentaram efeito osmoprotetor, mas a betaina exerceu osmoproteção permitindo o crescimento de ambas bactérias em concentrações inibitórias de NaCl. A cinética do crescimento sugere que a diferença em halotolerância entre as linhagens está associada à síntese de osmolitos, mais do que à capacidade de acúmulo de betaina.

The effect of organic osmoprotectors on Aeromonas trota and A. hydrophila grown under high sodium chloride concentrations

The effect of organic solutes on the growth of Aeromonas trota and A. hydrophila was evaluated. Proline and glutamic acid were not effective as osmoprotectors, but betaine exerts osmoprotection allowing the growth of both strains in inhibitory concentrations of NaCl. Growth kinetics suggests that the halotolerance difference between the strains is associated with the synthesis of osmolytes rather than betaine uptake.

O efeito de solutos orgânicos no crescimento de Aeromonas trota e A. hydrophila foi avaliado. A prolina e o ácido glutâmico não apresentaram efeito osmoprotetor, mas a betaina exerceu osmoproteção permitindo o crescimento de ambas bactérias em concentrações inibitórias de NaCl. A cinética do crescimento sugere que a diferença em halotolerância entre as linhagens está associada à síntese de osmolitos, mais do que à capacidade de acúmulo de betaina.